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液相色谱检测时样品的预处理与检测

发布时间:2019-05-31 09:33:19 作者: 点击数:

HPLC方法建立期间,在第一次进样前,我们必须有把握所选择的检测器能检测到所有的被测样品组分。通常首选可变波长紫外(UV)检测器,因这种检测器使用方便,且可用于大多数样品。uV光谱信息对方法建立具有举足轻重的地位,uv光谱数据可从文件使用”pdf Fact ory”试用版本创建文献中查找,也可通过所测样品成分的化学结构估算;直接测得(如果可拿到化合物纯品)或在HPLC分离期间用二极管阵列检测器(PDA)得到。样品对uv检测响应不足时,町考虑使用其它类型检测器(荧光,电化学等),或衍生化样品使检测信号增强。

HPLC方法

样品来源形式不同,可能以如下形式出现:

1.可直接进样的溶液.

2.需稀释、pH缓冲、加入内标或其它定容操作的溶液

3.必须首先溶解或提取处理的固体。

4.样品需预处理以除去十扰物和/或保护色谱柱或仪器不受损害。

进样系统

可直接进样的样品有操作方便、精密度好的优点,然而大多数HPLC分析的样品需称重和/或稀释定容后才能进样。当样品溶剂成分接近于流动相时,一般不会产生基线波动等问题,通常能够得到较好的结果。

有些样品在注人HPLC前需进行部分分离(预处理),以除去干扰物、浓缩样品或消除“柱杀手”,因此了解样品基质和各种被测物的浓度范围非常重要。许多情况下,建立满足要求的样品预处理方法甚至比完成一次良好的HPLC分离更具挑战性。样品预处理在第4章中将作详细讨论。